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ertebewwr1526 發表於 2012-11-21 23:59

蝴蝶蘭的組織培養技術

蝴蝶蘭的組織培養技術蝴蝶蘭為蘭科多年生附--生草本,又名蝶蘭,是蘭科植物中栽培最為廣泛的種類之一,主要分佈在熱帶及亞熱帶地區。其花形奇特,色彩豔麗,花期持久,素有“蘭中皇后”的美譽,具有極高的觀賞和經濟價值,在國內外花卉市場上極受歡迎。蝴蝶蘭是單莖氣生蘭,植株上極少發育側枝,比其他種類的蘭花更難於進行常規無性養殖。組織培養是建立蝴蝶蘭快速養殖無性系的重要手段。
  
  1 外植體的選擇
  
  蝴蝶蘭的莖尖、莖段、葉片、花梗側芽、花梗節間、根尖等部位都已有培養成功的報導,方法各異,難度各有高低。蝴蝶蘭不同外植體的成活率有差異,其中花梗側芽的成活率最高,達75%;其次為花梗,成活率為 62.5%;葉片和根尖最差,分別為12.5%和 7.5%。針對不同外植體,取材方法也不同,通常取花梗節之間1~2cm長的幼嫩部分,切取長 2~3mm 的切段作為外植體。
  
  2 基本培養基的選擇
  
  蝴蝶蘭組織培養所採用的基本培養基包括 MS、1/2MS、VW、B5、KC、花寶及其改良型等,其中1/2MS對蝴蝶蘭原球莖增殖效果最好。
  
  3 外源激素的選擇
  
  目前常使用的外源激素主要是生長素類(如IAA、2,4-D和NAA)和細胞分裂素類(如BA、ZT、KT)。蝴蝶蘭組織培養中常用的細胞分裂素為 6-BA,較高濃度(1~8mg/L)的 6-BA 能促進蝴蝶蘭原球莖增殖,較低濃度(0.1~0.5mg/L)的 6-BA 則能促進原球莖分化。適宜濃度的 6-BA 配合較低濃度的 NAA,更有利於原球莖的增殖,2.0mg/L 6-BA 和 0.3mg/L NAA配合使用是蝴蝶蘭原球莖增殖的最佳組合。
  
  4 培養基添加物對蝴蝶蘭增殖和分化的影響
  
  蝴蝶蘭組織培養中常加入一些天然物質如椰乳、香蕉泥、番茄汁、蘋果汁等,這些物質能提供一些必要的微量營養成分、生理活性物質和生長激素等,如加入100~200mg/L香蕉泥,具有較大的 pH 緩衝作用,有利於蘭科植物的壯苗和生根。許多資料也表明,添加適量的香蕉泥、椰乳或含膠質的果菜汁等均對原球莖增殖有明顯促進效果。
  適量的添加物對蝴蝶蘭叢生芽的誘導和生根也有一定的促進作用。培養基中添加活性炭,低濃度(0.5~1.0g/L)時對原球莖增殖影響不明顯,但可促進蝴蝶蘭生根;高濃度(2.0~3.0g/L)時對原球莖增殖有促進作用,但原球莖有黃化現象。
  蔗糖作為培養基的能源物質和滲透調節劑,對原球莖的增殖生長影響較大。蔗糖含量為 2%時,原球莖分化速度最快;蔗糖含量為2%~3%時,促進芽的形成;蔗糖含量為5%時,有利於根的分化和生長。蔗糖含量為3%~5%時,抑制原球莖的分化和生長,分化品質和分化速度都顯著下降。
  
  5 原球莖繼代中褐化的防治
  
  蝴蝶蘭和其他蘭科植物一樣,原球莖狀體在繼代培養過程中易褐變死亡,不易增殖。在培養基中添加1~2g/L活性炭,適時切除培養物的褐化部分並及時更換新鮮培養基,能有效抑制外植體褐變死亡;培養基中加入10%椰子水,也能促進原球莖的生長,減少原球莖增殖過程中的褐變。蝴蝶蘭的群體效應很明顯,單芽容易褐化死亡,且增殖較慢,因此,剛誘導出的原球莖狀體不能過早切割轉移,在繼代階段接種時,應儘量避免切成單芽,增殖時切塊也不宜過小,否則容易褐化死亡。6~8月份高溫季節采芽排出的褐變物質多,成活率也最低,所以要避免在夏季采芽。
  
  6 外界條件對蝴蝶蘭的影響
  
  培養基的pH值直接影響到培養物對離子的吸收,過酸或過堿都對植物材料生長有很大影響,此外,瓊脂培養基的pH還影響到凝固情況。原球莖在pH值5.0~5.4的環境中生長最好,叢生芽的誘導與增殖在pH值5.6~5.8的環境中較好。
  蝴蝶蘭在組織培養中,通常都以日光燈為光源,因此,可以人為地進行控制其光照強弱。光照強度對試管苗發根和生長勢均有明顯的影響。光照為3000lx對蝴蝶蘭根誘導和植株生長有利。
  在誘導蝴蝶蘭叢生芽過程中,由於所取的花梗芽為花芽,在培養過程中,較低的溫度影響(15~22℃)會使大部分花梗芽發育成花芽;在較高溫度(23~26℃)下培養,花梗花芽轉化為營養芽,所以在進行蝴蝶蘭叢生芽誘導時的適宜溫度條件為(25±2)℃。
  
  7 生根壯苗及移栽
  
  生根壯苗階段關鍵在於嚴格篩選激素的種類和濃度,一般需降低培養基的激素含量,以便形成健壯苗。常用的生長素有IBA(0.3~1.5mg/L)、NAA(0.1~0.8mg/L)。添加GA3 0.1mg/L + NAA 0.1mg/L 的組合能明顯提高生根率,且植株健壯,長勢好。
  蝴蝶蘭屬熱帶氣生蘭,具氣生根,栽培上要求根部通氣良好。現在蝴蝶蘭移栽常用基質有水苔、椰糠、蛇木、樹皮等,以水苔效果較好。
  綜上所述,用組培方法快繁蝴蝶蘭較傳統養殖方法有3個明顯的優點:?節省育苗用地;?節省養殖材料,提高養殖係數;?利用莖尖脫毒培養,挽救因受病毒侵染而退化的優良品種,提高品質和欣賞價值。總之,組培快繁技術可大大提高生產效益和經濟效益。

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